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1、取动物胚胎或幼龄动物器官、组织。
2、将材料剪碎,并用胰蛋白酶(或用胶原蛋白酶)处理(消化),形成分散的单个细胞,将处理后的细胞移入培养基中配成一定浓度的细胞悬浮液。
3、悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。
4、当贴壁细胞分裂生长到互相接触时,细胞就会停止分裂增殖,出现接触抑制。
5、此时需要将出现接触抑制的细胞重新使用胰蛋白酶处理。
6、再配成一定浓度的细胞悬浮液。
7、另外,原代培养就是从机体取出后立即进行的细胞、组织培养。
8、当细胞从动植物中生长迁移出来,形成生长晕并增大以后,科学家接着进行传代培养,即将原代培养细胞分成若干份,接种到若干份培养基中,使其继续生长、增殖。
9、通过一定的选择或纯化方法,从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞称为细胞株。
10、当培养超过50代时,大多数的细胞已经衰老死亡,但仍有部分细胞发生了遗传物质的改变出现了无限传代的特性,即癌变。
11、此时的细胞被称为细胞系。
12、培养基添加胰岛素可促进细胞对葡萄糖的摄取。
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